移植鼠标服务

动物模型核心为转基因小鼠生产提供全方位亲核注入服务转基因鼠标生产在C57BL/6中例行操作,并按请求提供FVB或混合菌株等其他菌株转基因注入也可以由客户提供定制菌株中进行转基因克隆和BAC重采服务可用于转基因生产

提交脱氧核糖核酸

对小于20kb的转基因生物,UNC动物模型核心设施通常从客户提供的脱氧核糖核酸生成转基因小鼠转基因克隆净化服务应请求提供BAC转基因脱氧核糖核酸总由Core准备注入对最优数创建者而言,转基因粒子应使用免内毒系统净化,如QiagenEndoofe系统(Catalog#12362)整片或多片柱骨架应该从透式脱氧核糖核酸约束酶中切除,这样转基因脱氧核酸很容易通过arose凝胶电阻从流骨架中分离出来客户应该向设施提供20微米消化式脱氧核糖核酸客户还须提供素数素数供基因组潜在创建者使用,并证明解析法可检测转基因生物/基因组与基因组DNA相混合时PCR

客户请求BAC转基因服务应联系核心主管程序向核心提交BAC克隆核心BAC转源定价包括BAC脱氧核糖核酸准备和脉冲场电极

亲核微注入

所有客户都需填写AMC服务请求表转基因脱氧核酸注入C57BL/6或FVB胚胎子子并植入伪孕接受母小狗大约3周后出生,由核心提供注入和基因组学创建者一断网 即转介客户设施亲核微注入服务包括注入400个胚胎或生产3个创建者,取先实现者设施的目标是为每次实验生成最少3个转基因创建动物不同的创建线可能显示不同的表达层次,有些创建者可能不向子孙传输转基因,而有些线可能根本不表示转基因3创建者生产为获取至少1条优转基因线提供合理机会设施不保证创建者生产、子宫传输或基因表达方式创建者及其子孙有害转基因可能导致无法获取创建者或获取子系传递或表达注入400个胚胎后不获取转基因动物,客户收费服务并咨询设施主管unc动物空间必须请求DLAM并必须在项目启动前安全无法安全动物空间将导致额外收费并可能导致贵重动物损失

生成转基因鼠标协议详解见:ittnerLM,GötzJ转基因小鼠生产亲子注入纳特普罗托.2007;2(5):1206-15.